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產品簡介
qa-bio：PNGase F ：PNG酶FPNG酶F將N連接（天冬酰胺連接）寡糖從糖蛋白中切割出來。酶在37°C下至少保持活性96小時
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | E-PNG01 |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
QA-Bio成立于2002年，致力于為生物制藥制造界提供分析糖鏈所需的工具。
我們的產品被全球生物制藥公司采用FDA和EMA批準的程序。我們優化試劑盒和試劑的化學成分、材料、制造和存儲工藝，以保持最高的準確性和可重復性性能標準。我們所有的套件都設計得兼顧便利、速度和易用性。
qa-bio：PNGase F ：PNG酶F
PNG酶F、肽N糖苷酶F、N-糖苷酶、N-糖苷酶
PNG酶F，也稱為肽N-糖苷酶F，是一種常用于分子生物學和生物化學研究的酶。它在研究糖蛋白中起著關鍵作用，糖蛋白是帶有糖分子（糖鏈）的蛋白質。PNG酶F用于從糖蛋白中去除N連接糖鏈，是多種科學應用中的寶貴工具。
PNG酶F的使用：
糖蛋白脫糖基化：PNG酶F通過酶促切斷N鏈糖鏈與糖蛋白。N連接糖鏈是一種特定類型的糖鏈，附著在蛋白質氨基酸序列中的天冬酰胺（N）殘基上。
在糖蛋白分析中的重要性：從糖蛋白中去除糖鏈對于研究其底層蛋白質結構和功能至關重要。它使研究人員能夠分析蛋白質核心，準確確定其分子量，并研究其生物活性。
應用：PNGase F 廣泛應用于蛋白質組學、結構生物學、免疫學和制藥研究等多種領域。它在表征糖蛋白、理解其在細胞過程中的作用以及開發治療藥物方面發揮了關鍵作用。
生物醫學研究：在生物醫學研究中，PNG酶F被用于分析與癌癥、糖尿病和傳染病等疾病相關的糖蛋白。它有助于識別生物標志物和潛在的藥物靶點。
質量控制：在生物制藥行業，PNGase F被用于通過驗證糖鏈結構和監測糖基化模式，確保基于糖蛋白的藥物（如單克隆抗體）的質量和一致性。
糖蛋白工程：研究人員可以利用PNGase F對糖蛋白進行特定改造，如提升藥物療效或改變糖鏈結構以用于研究或治療。
PNGase F 規范與協議：
PNG酶F是一種多功能酶，用于糖蛋白研究，使研究人員能夠研究其結構、功能以及在各種生物過程和應用中的意義。它能夠從糖蛋白中去除N-連接糖鏈，使其成為分子生物學和生物化學研究中的寶貴工具。
PNG酶F將N連接（天冬酰胺連接）寡糖從糖蛋白中切割出來。該酶將天冬酰胺脫氨為天冬氨酸，保留寡糖。PNG酶F無法去除植物糖蛋白上常見的含α-（1,3）連接核心富蘇糖的寡糖;為此，使用肽N-糖苷酶A。
變性會加快斷裂速率。大多數天然蛋白仍可脫糖，但可能需要延長孵育時間。該酶在反應條件下（37°C）至少可保持活性96小時。
有許多替代酶可用于去除N-糖鏈，尤其是Endo F家族酶和Endo H。這些酶在寡糖核心的兩個N-乙酰氨基葡萄糖殘基之間切割，生成一個截斷的糖分子，天冬酰上還剩下一個N-乙酰氨基葡萄糖殘基。這增強了溶解度，使蛋白質在與PNGase F脫糖后沉淀，從而保持低聚糖的完整。內藤F1能切割高甘露糖和一些雜交型N-糖鏈。Endo F2 能去除雙觸角和高甘露糖（降低率為40倍）。內膜F3釋放三觸角和富柯基雙觸角N-糖鏈。內分泌H去除雜交或高甘露糖鏈。
qa-bio：PNGase F ：PNG酶F
PNG酶F 來源 Elizabethkingia miricola（曾是腦膜敗血菌）)
EC 3.5.1.52 PDB 1PGS UniProt Q9XBM8
目錄PNG酶F在20 mM三鹽酸鹽中，pH值7.5
包含20微升和60微升包裝：
5次反應緩沖液7.5–250毫米磷酸鈉，pH 7.5
變性溶液–2% SDS，1百萬貝塔巰基乙醇
Triton X-100–15%溶液
特定活性>25 U/mg
活動5 U/ml
分子量：35,000道爾頓
pH值范圍6-10，最佳值7.5
PNG酶F方案
1。在Eppendorf管中加入最多200微克糖蛋白。用去離子水調整至35微升最終體積。
2. 加入10微升、5倍反應緩沖液、7.5和2.5微升的變性溶液。加熱至100°C5分鐘。
3. 酷。加入2.5微升的Triton X-100，然后混合。
4. 向反應中加入2.0微升酶。在37°C下孵育3小時。
特異性切割所有天冬酰胺連接的復合物、雜交或高甘露糖寡糖，除非α（1-3）核心富柯化;天冬酰胺必須在兩端結合肽鍵，且無Endo F
具體活動定義為催化1微摩爾變性RNase B中N連接寡糖釋放所需的酶量，時間為37°C，pH值為7.5。切割過程通過SDS-PAGE監測（切割后的RNase B遷移更快）。
存儲酶儲存在4°C。
穩定性 妥善保存，至少穩定24個月。幾天暴露在環境溫度下并不會減少活動。
上海寶葉生物科技有限公司
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